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星品推薦 | 安全低毒高質量的新型MIDORIGreen核酸染料

核酸染料是分子生物學實驗中不可或缺的試劑,其中溴化乙錠(EtBr)靈敏度,長期以來一直被用作核酸染色的標準染料。但是EtBr具有潛在的誘變和致癌作用,EtBr能與DNA嵌合,引起細胞突變,長期接觸可能對人體健康產生負面影響。NIPPON GENETICS推出新型MIDORIGreen系列核酸染料,是一種非致癌性和非致突變性的染料,無法穿透乳膠手套和細胞膜。同時致突變性試驗(Ames試驗)和細胞毒性試驗均為陰性,因此是一種安全度的核酸染料[1]。

紫外光與EtBr染色至今仍一起被用于分子生物學實驗室中檢測核酸。然而紫外光譜導致DNA樣品的修飾和降解,30秒的紫外線曝光足以大幅降低克隆效率。/綠LED在470 nm - 520 nm處發(fā)出安全可見光這種光譜對 DNA 沒有破壞性,與紫外光相比,DNA完整性和克隆/測序效率完全不受影響,即使在長時間的光照下也是如此。MIDORIGreen系列核酸染料經過優(yōu)化,可在紫外光或藍/綠光激發(fā)時獲得更亮的信號,同時也兼容紫外光。

1:EtBr和MIDORIGreen吸收光譜對比

MIDORIGreen產品特點

?      出色的信號質量

?      用于凝膠內染色和后染色的安全核酸染料

?      溴化乙錠的安全替代品:非致癌無毒

?      適用dsDNA、ssDNA或RNA染色

?      膠染法和泡染法均可

 

MIDORIGreen Advance

MIDORIGreen Advance靈敏度EtBr相當,可以直接添加到熔融的瓊脂糖中。同時兼容紫外線或藍/綠LED,因此無需更改原有的實驗步驟。MIDORIGreen Advance的稀釋倍數(shù)可高達1:25000。100 mL瓊脂糖凝膠只需4μL至6μL,每1mL的染料可配置約17L至25L瓊脂糖凝膠。

MIDORIGreen Direct

MIDORIGreen Direct中已經包含10X Loading Buffer,可以直接添加到核酸樣品中無需將其或任何其他染料添加到凝膠基質。相較于在凝膠中添加染料的染色方式,核酸的直接染消除了背景染色,提供了完美的信噪比。1 mL的 MIDORIGreen Direct提供1,000至2,000個樣品的染色。

MIDORIGreen Direct可以為下游提供更好的結果

從瓊脂糖凝膠中分離核酸可以進一步下游應用,許多染料,如EtBr甚至SYBR? Green,由于其嵌入特性,都是強酶抑制劑。MIDORI Green 染料與 DNA 骨架結合的方式能為下游應用帶來更高的效率,包括克隆、測序、PCR等。[2]

2:相較于EtBr,MIDORIGreen Direct轉化的E.coli菌落數(shù)增加,提高了轉換效率


 

MIDORIGreen Xtra

MIDORIGreen Xtra是NIPPON GENETIC最新一代核酸染料,針藍/綠LED和藍LED光源進行了優(yōu)化,可以在瓊脂糖凝膠中產生強熒光信號。同時MIDORIGreen Xtra不會對瓊脂糖凝膠進行染色,因而具有低的背景噪音,從而獲得出色的信噪比。由于非常低的背景熒光,這使得識別少量 DNA 變得非常容易,因此MIDORIGreen Xtra具有靈敏度。

圖3:使用MIDORI Green Xtra檢測的DNA條帶具有超高靈敏度注:左圖使用藍色/綠色 LED 透射儀進行檢測;右圖使用藍色LED透射儀進行檢測。

 

MIDORIGreen easy

MIDORIGreen easy具有與MIDORIGreen Xtra相同的出色信號質量和低背景擁有EtBr更好的信號,MIDORIGreen easy的開發(fā)是為了可以輕松替換SYBR®safe,同時染色方案不需要改變。MIDORIGreen Easy的稀釋倍數(shù)可高達1:10000,100 mL瓊脂糖凝膠只需8μL至10μL。


圖4MIDORIGreen easy(左)MIDORIGreen Xtra(右)使用藍/綠 LED 激發(fā)燈。

 

MIDORIGreen系列檢測光譜與靈敏度

產品

/LED

LED

UV-Light

靈敏度

MIDORIGreen Advance

?

+

MIDORIGreen Direct

?

+ +

MIDORIGreen Xtra

?

+ + +

MIDORIGreen Easy

+ +

注: 表示兼容;?表示兼容但不推薦;

 

 

MIDORIGreen核酸染料系列產品列表

貨號

品名

規(guī)格

MG04

MIDORIGreen Advance

1 ml (25.000x -可染色25L凝膠)

MG06

MIDORIGreen Direct

(loading buffer)

1 ml (10x conc. -可直接添加樣品)

MG10

MIDORIGreen Xtra

1 ml (25.000x -可染色25L凝膠)

MG12

MIDORIGreen Easy

0.4 ml (10.000x -可染色4L凝膠)

 


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